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645A-白膜層(céng)分離及核酸提取自動化方案-(貝克曼)
生物(wù)技術的飛速發展,也讓生物資源的利用(yòng)更加精(jīng)準和充分。人(rén)的血(xuè)液是個巨大的寶庫,可以(yǐ)輔助疾病診斷與治療。隨著(zhe)精準醫療的提出,個體(tǐ)化診斷、CART治療、單(dān)克隆抗體治療等技術不斷成熟(shú)普及,血液的利用也越來(lái)越廣泛,尤其是特定成分的使用。血液經(jīng)離心分離,從上到下,可以獲得血漿、白膜層和紅細胞等。其中,白膜層(céng)的分離需要專業的技術和熟(shú)練的技巧,手工操作緩慢而繁瑣。
Beckman Biomek i5自動化工作站可以精準定位、快速(sù)分(fèn)離白膜層,使流程標準化,消除不(bú)同技術人員(yuán)的操作差異,提高白膜層核酸提取的產量和質量,並實現高通量樣品處理。
*掃描采血管條形碼記錄樣本信息
*拍照模(mó)塊對采血管進行拍照
*液麵分析係統對紅細胞(bāo)層、血(xuè)漿層和白膜層(céng)進行(háng)高度(dù)分析(xī)
*分析(xī)結果上傳(chuán)到Biomek軟件
*Biomek軟件根據(jù)分析係統結果進行(háng)液(yè)麵高度確認
*Biomek軟件根據白膜層高(gāo)度,驅動加樣器進行白膜層分(fèn)離
Biomek i5自動化工(gōng)作站。該款工作站配置了靈活8通道加樣器、1個斜側抓板機械手、渦旋(xuán)振蕩模塊、吸頭回放模塊(kuài)以及(jí)拍照模塊。拍照和采血管架模塊可(kě)根(gēn)據需要進行拆卸,拆卸後可增加9個通用板位。分離96個樣本的白膜層需要約20min。
白膜層(céng)主(zhǔ)要包括富含血小板區(qū)、富含淋巴細胞區、富含單核細胞區和富含粒細胞區,粘度較大,使用1000ul寬口吸頭可(kě)以更(gèng)好地吸取白膜層。
內置(zhì)轉圈吸液模板,最大限度模擬(nǐ)手工吸取白膜層操作,提高分離效率。
磁珠法白膜層核酸提取流程
白膜層核酸提取台麵布局舉例。96個樣本的白膜層核酸提取所(suǒ)需耗材:
(1)2盒100Ou吸(xī)頭,分別用於吸取試劑(jì)、白膜層和廢液。
(2)1盒20Oul吸頭,用於轉移洗脫後核酸。
(3)4個試劑槽,用於放置各種裂解液、洗滌液和洗脫液(yè)
(4)2個深孔板,分別(bié)作為提取板和廢液板(bǎn)。
(5)1個(gè)PCR板,用(yòng)於存放提取(qǔ)後的核酸。
(6)1個磁力架,用於吸附磁珠。
Biomeki5 自動化工作站使用的耗材和試(shì)劑品牌開放,用戶可根據需要(yào)選擇國產或進口品(pǐn)牌的耗材和試劑,成(chéng)本掌握在用戶手中。
靈(líng)活8通道移液(yè)器,每個通道均可獨立控(kòng)製,間距(jù)可根據不同孔間距的耗材自動調(diào)整,可(kě)同時吸取(qǔ)不同體積的液體。
斜(xié)側抓板機械手,實現(xiàn)工作站內及(jí)周邊耗材的搬運,斜(xié)側夾(jiá)板(bǎn)屬性保證耗材搬運無局限性,充分利用台麵空間。
渦旋振蕩模塊,振速0-180ORPM。模塊上帶有自動夾板器及感應裝置,樣品板在被夾板器固定(dìng)後才進行高速振蕩,過程安全可靠。
拍照模塊,具備(bèi)兩個高清拍照鏡(jìng)頭,可以對不同高度的紅細胞層、白膜層、血漿(jiāng)層進行識(shí)別及定位,LED燈用於(yú)拍照過程(chéng)的光補償(cháng)。
獨立孔結構吸頭盒(hé),每個吸頭都有獨立(lì)的存放(fàng)空間,可自動將用過的吸頭回放至原吸頭盒的原(yuán)孔中,不會發生氣溶膠交叉汙染,在實驗設(shè)計允許(xǔ)的(de)情況可重複使用,節約成本。
Table.1 白膜層核酸提取結(jié)果。起始樣本為8個白(bái)膜層樣本各200u利用 GenFind V2 核酸提取試劑(jì)盒通過磁珠法進行核酸提(tí)取,用Nanodrop檢測核酸濃度和純度。從上表測得的結果可以看出,Biomek工作站提取核酸的(de)濃度、純(chún)度良好。